gtex全称如下
<blockquote>Genotype-Tissue Expression
该项目对来自人体多个组合和器官的样本,同时进行了转录组测序和基因分型分析,构建了一个组织特异性的基因表达和调控的数据库。网址如下
https://gtexportal.org/home/
包含的组织类型和样本个数如下图所示
对于所有的样本,主要进行了以下三种分析
通过illumina Truseq试剂盒构建polyA+文库,采用Hiseq 2000/2500进行测序,对于下机数据,采用STAR进行比对,参照选择的是gencode V19版本的gtf文件,进行了以下3个level的定量
gene-level,采用RNAseQC软件,对基因的raw count和TPM两种方式进行定量
exon-level, 对exon的raw count进行定量
transcript-level,采用Rsem进行转录本水平的定量
通过WGS对样本进行分型, 采用的是GATK germline variants calling的流程,步骤如下
bwa-mem alignment
picard markduplicate
BQSR
indel realign
haplotypeCaller
通过FastQTL软件进行cis-eQTL分析,将基因型和基因表达量进行关联。
通过官网可以查看基因表达量和eQTL分析的结果,以TP53
为例,每个基因给出了以下3个层级的表达量
Isoform Expression
Exon Expression
Junction Expression
分别对应转录本,外显子,剪切序列的表达量,对于不同组织中的表达量,以热图的形式进行展示,示意如下
对于基因结构,也进行了可视化,示意如下
eQTL的结果示意如下
提供了以下两种可视化方式,第一种是在单个组织内的小提琴图,eQTL violin plot, 示意如下
第二种用于多个组织间的比较,multi-tissue eQTL plot, 示意如下
所有的分析结果可以通过官网进行下载,GTEx数据库不仅仅是一个正常组织的基因表达量数据库,其eQTL分析的策略更值得我们借鉴。
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